新品速遞 限時半價 C0050 ?BCA蛋白濃度測定試劑盒

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即日起至7.31 限時半價

500 T﹣目錄價420，折后價210

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??產品描述：

BCA（Bicinchoninic acid）是應用最廣泛的蛋白濃度測定方法，常用于蛋白提取后的定量檢測，具有操作簡單、穩定性好、靈敏度高和兼容性高等優勢。

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BCA蛋白濃度測定試劑盒的檢測原理涉及兩步化學反應，第一步基于雙縮脲反應，在堿性環境下蛋白質與二價銅離子絡合并將二價銅離子還原為一價銅離子，形成藍色復合物。第二步是BCA與一價銅離子結合形成穩定的藍紫色復合物，該復合物在562 nm處有較高的吸光值，并與蛋白質濃度呈正比。

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??包裝清單：

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??產品特點：

1.?靈敏度高：最小檢測蛋白量達到0.5 μg，檢測濃度下限達到25 μg/mL，待測樣品體積為1-20 μL。

2.?線性范圍廣：在25-2000?μg/mL濃度范圍內有較好的線性關系。

3.?操作簡單：正常情況下可在45分鐘內完成測定，比經典Lowry方法速度快四倍。

4.?兼容性好：BCA法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響，可以兼容樣品中高達5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20、60、80。但本試劑盒受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響，需確保EDTA低于10mM，無EGTA，DTT低于1mM，β-Mercaptoethanol低于0.01%。

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??操作說明：

1.?蛋白標準品和待測樣品的準備

1)?向一管30 mg的BSA蛋白標準品中加入1.2 mL蛋白標準品配制液，充分溶解后配制成25 mg/mL的蛋白標準品溶液。配制后儲存于-20°C。

2)?取適量25 mg/mL的蛋白標準品溶液，用蛋白稀釋液稀釋至終濃度0.5 mg/mL。可長期儲存于-20℃。

注：待測蛋白樣品在什么溶液中，蛋白稀釋液也宜為相同溶液。也可以用0.9% NaCl或PBS作蛋白稀釋液。

3)?將0.5 mg/mL的蛋白標準品溶液，按0、1、2、4、8、12、16、20 μL加到96孔板的標準品孔中，再分別加蛋白稀釋液補足至20 μL，相當于蛋白標準品濃度分別為0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4，0.5?mg/mL。

4)?加適當體積待測樣品到96孔板的樣品孔中。如果樣品不足20?μL，需加蛋白稀釋液補足到20?μL。

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2.?BCA工作液配制

根據樣品數量，按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B（50：1）配制適量BCA工作液，充分混勻。例如5?mL BCA試劑A加100?μL BCA試劑B，混勻，配制成5.1?mL BCA工作液。BCA工作液室溫24小時內穩定。

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3.?蛋白濃度測定

1)?各孔加入200 μL?BCA工作液， 60℃放置30分鐘。

注：BCA法測定蛋白濃度時，顏色會隨著時間的延長不斷加深。并且顯色反應會因溫度升高而加快。如果濃度較低，適合在較高溫度孵育，或適當延長孵育時間。注意保持定時和定溫，以確保精確定量。

2)?用酶標儀測定562?nm波長的吸光度。

3)?根據BSA標準品的吸光度，繪制標準曲線（X-蛋白濃度ug/mL；Y-A562）。依據標準曲線和樣品的稀釋倍數計算樣品蛋白濃度。

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??不同品牌?BCA 試劑盒的標準曲線對?

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??保存條件

試劑盒中的A、B液及蛋白標準品配制液室溫保存。蛋白標準品（BSA）粉末室溫保存，配成溶液后可置于-20℃保存一年。

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??注意事項

1.?本方法適合用于96孔板使用酶標儀檢測。如果沒有酶標儀，也可以使用普通的分光光度計測定，但測定時，需根據比色皿的最小檢測體積，適當加大BCA工作液和標準品、樣品的用量。

2.?低溫或長期保存時，若發現試劑A或試劑B有沉淀，請37oC溫育并攪拌使其充分溶解。如發現細菌污染，則應丟棄，避免對實驗結果造成影響。

3.?建議每次測定都做相應的標準曲線，因為顯色反應與溫度和時間的變化有關，精準的蛋白定量宜每次都做標準曲線。

4.?本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。

5.?為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。